多数老鼠都以夜间活动为主，黄昏和黎明前有两个活动高峰期。这种活动的周期性会受到种群数量变动的影响。密度高或食物来源短缺时，会促使体弱和处于从属地位的个体白天活动。在特殊情况下，如粮库、食品企业和养鸡场等处，无论白天黑夜只要人不在，都可能出来活动。家鼠经常沿墙根和物体行走，或在物体下面活动。较少走在空旷处，即使走到也是匆匆而过，绝不久留。
